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產(chǎn)品展示Products
葡聚糖凝膠G-25
葡聚糖凝膠G-25
更新時間:2025-01-13
型    號:
所屬分類:常用試劑
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葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質溶液中溶脹。親水基質使其非特異性吸附小化,并在生物分子分離期間得到較高的回收率。

葡聚糖凝膠G-25產(chǎn)品概述:

貨號

產(chǎn)品名稱

英文名稱

CAS號

產(chǎn)品特征

Js14031-100g

葡聚糖凝膠G-25

Sephadex G-25

9041-35-4

分離:肽及球形蛋白質:1000~5000;葡聚糖(線性分子):100~5000

Js14031-25g

葡聚糖凝膠G-25

Sephadex G-25

9041-35-4

分離:肽及球形蛋白質:1000~5000;葡聚糖(線性分子):100~5000

Js14031-500g

葡聚糖凝膠G-25

Sephadex G-25

9041-35-4

分離:肽及球形蛋白質:1000~5000;葡聚糖(線性分子):100~5000

 

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英文名: Sephadex G-25

別名: 交聯(lián)葡聚糖凝膠G-25

CAS號: 9041-35-4

此說明僅限參考

 

葡聚糖凝膠 G 系列使用說明

1化學和物理性質

  葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質溶液中溶脹。親水基質使其非特異性吸附最小化,并在生物分子分離期間得到較高的回收率。G 型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。

葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要*分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,可在較低的壓力下獲得較高的流速。另外, 粗級也可用于批量工藝。

2產(chǎn)品說明

產(chǎn) 品 名 稱 分離范圍(球蛋白)

葡聚糖凝膠 G-10 <700 緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子

葡聚糖凝膠 G-15 <1500 緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子

葡聚糖凝膠 G-25 1000-5000 工業(yè)上脫鹽及交換緩沖液

葡聚糖凝膠 G-50 1000-30000 多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定

葡聚糖凝膠 G-75 2000-70000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定

葡聚糖凝膠 G-100 2000-120000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定

葡聚糖凝膠 G-150 5000-300000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定

葡聚糖凝膠 G-200 5000-600000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定

3使用方法

葡聚糖凝膠 G 系列產(chǎn)品以干粉形式存在,使用前必須溶脹,在膨脹期間應避免過度攪拌,因為它可能破壞填料,不要使用磁力攪拌器。

3.1填料的準備

(1)將填料在過量去離子水或緩沖液中,室溫條件下膨脹 3 小時,或用熱水膨脹 1 小時。洗脫緩沖液不應含有高粘度的試劑。溶脹過程中,如果上層有碎膠,請去除。

(2)將溶脹好的填料,所有的緩沖液等材料平衡至實驗操作溫度。

3.2裝柱

(1)檢查層析柱所有部件,特別是過濾網(wǎng),密封圈,螺旋塞是否緊密,玻璃管是否干凈和完整。

(2)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務 必使底端無氣泡。

(3)用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。

(4)打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的 1.33 倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定(注意壓力不要超過填料最大耐壓)。

3.3平衡

上樣前平衡層析柱至少 5-10 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的 PH 值和等電點等于上柱的Buffer 的PH 值和等電點)。

3.4上樣

樣品一定要離心或過濾后(0.45um)上樣。

凝膠過濾的上樣量一般為不大于 5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的柱床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時上樣量可以達到 20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關,柱高過高的凝膠層會引起較大的反壓,應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為 5:1 即可。

3.5洗脫方法

可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱 Buffer 中加入 NaCl 等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

3.8 在位清洗(CIP)

凝膠使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h 用 0.1 M 氫氧化鈉洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

注意事項:

1.上樣之前,樣品必須經(jīng)過膜過濾及去除色素,否則雜質及色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用。

2.在使用過程中,避免使用高濃度的強酸強堿,酸和堿的濃度應低于 0.15 摩爾。堿會使流速變慢。

3.不同的樣品,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關的文獻進行。

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