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DNA甲基化實(shí)驗(yàn)服務(wù)
DNA甲基化實(shí)驗(yàn)服務(wù)
更新時(shí)間:2025-01-02
型    號(hào):
所屬分類:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
報(bào)    價(jià):300
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提供商: 上海研謹(jǐn)生物
服務(wù)名稱: DNA甲基化實(shí)驗(yàn)服務(wù)
服務(wù): 3-5周
規(guī)格: 實(shí)驗(yàn)服務(wù)
價(jià)格: 300元

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)服務(wù)產(chǎn)品概述:

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)服務(wù)


甲基化檢測(cè)

DNA的甲基化(Methylation) 是早發(fā)現(xiàn)的基因表觀修飾之一,甲基化僅修飾胞嘧啶,DNA的甲基化修飾是在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下使CpG雙核苷酸5端的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)?-甲基胞嘧啶,由于CpG島主要位于基因的啟動(dòng)子和第--外顯子區(qū)域,其甲基化修飾通常抑制基因的表達(dá),去甲基化后基因重新活化和表達(dá)。DNA甲基化修飾方式在不改變基因序列的前提下實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控。


主要檢測(cè)方式

1. MSP:甲基化特異性PCR (Methylation-specific PCR)即用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA.未甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,甲基化的胞嘧啶不會(huì)發(fā)生改變,設(shè)計(jì)針對(duì)甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后通過(guò)電泳等檢測(cè)手段檢測(cè)MSP擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)確定位點(diǎn)是否存在甲基化。


2. BSP:亞硫酸氫鹽測(cè)序法(Bisulfite sequencing PCR)與MSP相似,用亞硫酸氫鹽將未甲基化胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,設(shè)計(jì)BSP引物進(jìn)行PCR,擴(kuò)增中尿嘧啶全部轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序來(lái)判斷CpG位點(diǎn)是否甲基化。


  • HRM:高分辨率溶解曲線法(High Resolution Melting)原理也是用亞硫酸氫鹽處理。未甲基化的胞嘧啶經(jīng)PCR擴(kuò)增變成胸腺嘧啶,樣品中的GC含量發(fā)生變化從而溶解溫度發(fā)生變化,從而確定位點(diǎn)是否發(fā)生甲基化?;谙拗菩詢?nèi)切酶的


測(cè)序方法:

1.靶向富集甲基化位點(diǎn)的測(cè)序方法

2. SMRT測(cè)序法


結(jié)果展示

Assay Name: miR-152-S1(8CpG)

Sample ID: Si

Note:




實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)


1.實(shí)驗(yàn)周期: 3-5周

2.交付標(biāo)準(zhǔn):甲基化檢測(cè)結(jié)果、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等)

需確認(rèn)的信息

1.目的基因及種屬

2.樣本類型(細(xì)胞、組織、血液等)

3.目的基因片段

參考文獻(xiàn)

[1] Sato S , Uemoto Y , Kikuchi T , et al. SNP- and haplotype-based genome-wide association studies for growth,

carcass, and meat quality traits in a Duroc multigenerational population[J]. Bmc Genetics, 2016, 17(1):60.

[2] Ichikawa K, Tomioka S , Suzuki Y , et al. Centromere evolution and CpG methylation during vertebrate speciation[J].

Nature Communications, 2017. 8(1):1833.

[3] Yang Y , Scott S A. DNA Methylation Profling Using Long-Read Single Molecule Real-Time Bisulfite Sequencing

(SMRT-BS)[J] Methods Mol Biol, 2017, 1654:125-134.

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single-molecule real-time bisulfite sequencing (SMRT-BS).J]. Bmc Genomics, 2015, 16(1):350.


收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:

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實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

 

WB代做

HE染色

免疫熒光染色

蛋白相互作用分析

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免疫組化

熒光定量PCR

番紅O固綠染色

流式細(xì)胞分選技術(shù)

激光共聚焦

透射電鏡服務(wù)

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀(Co-IP

DNA甲基化

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光

免疫組化IHC染色

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

原位雜交(FIsh

石蠟/冰凍切片凋亡

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP

CCK8檢測(cè)

蛋白雙向(2-D)電泳

蛋白雙向2D-WB

ATP/ADP檢測(cè)

Taqman探針

細(xì)胞劃痕

基因組DNA提取



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